RESUMO Os carrapatos estão envolvidos em processos biológicos de uma grande variedade de organismos patogênicos. O gênero Amblyomma é o de maior importância médica, com a espécie Amblyomma sculptum Berlese, 1888 envolvida no ciclo de transmissão da febre maculosa brasileira (FMB). Neste estudo, objetivou-se a validação molecular para uma diferenciação na característica morfométrica e no tamanho de idiossoma de larvas de duas espécies de carrapatos, Amblyomma dubitatum Neumann, 1899 e A. sculptum. Larvas não alimentadas foram coletadas em duas áreas de transmissão para FMB, por meio da técnica de armadilha atrativa de CO2. Foram identificadas em nível de espécie por morfometria comparativa, análise molecular por PCR e sequenciamento genômico, com validação pela análise de concordância pelo teste Kappa. As larvas de A. dubitatum apresentaram um comprimento significativamente maior que as larvas de A. sculptum. Embora nenhuma outra espécie do gênero Amblyomma tenha sido testada neste estudo, essa técnica poderá ser utilizada nos locais onde levantamentos acarológicos prévios, baseados nos estádios de ninfa e adultos, indicaram a presença de apenas A. sculptum e A. dubitatum, geralmente mantidos por capivaras. Digno de nota, essa condição é muito comum ao longo das áreas endêmicas para FMB na região Sudeste do Brasil.

ABSTRACT Ticks are involved in biological processes of a wide variety of pathogenic organisms. The genus Amblyomma presents the greatest medical importance, with the species Amblyomma sculptum Berlese, 1888 involved in the transmission cycle of Brazilian Spotted Fever (BSF). In this study, we performed a molecular validation of the morphometric differentiation based on the idiosomal length of the larvae of A. dubitatum and A. sculptum. Unfed larvae were collected in two BSF-transmission areas, using the attractive CO2 trap technique. Larvae were identified at the species level by comparative morphometry, molecular analysis by PCR and genomic sequencing, with validation through agreement analysis by the Kappa test. The larvae of A. dubitatum showed a significantly longer idiosomal length than A. sculptum larvae. Although no other species of the genus Amblyomma has been tested in this study, this technique can be applied to places where previous acarological surveillances based on adult and nymphal ticks stages have indicated the presence of only A. sculptum and A. dubitatum, usually sustained by capybaras. Noteworthy, this condition is very common among many BSF-endemic areas in southeastern Brazil.

RESUMO O presente trabalho é o primeiro a ser realizado com cães nos municípios de Natividade, Porciúncula e Varre-Sai e tem por objetivo pesquisar Rickettsias do Grupo da Febre Maculosa em soros de cães, por meio da reação de imunofluorescência indireta, e identificar o provável agente causador da reação sorológica nos animais. Dos caninos amostrados, 67,59% (171/253) foram sororreativos para Rickettsia rickettsii e 11,07% (28/253) para Rickettsia parkeri, ambos em diluição de 1:64. A titulação dos soros testados contra antígenos de R. rickettsii chegou a 1:131.072, e para R. parkeri, 1:4.096. Conclui-se que cães são importantes sentinelas para a infecção por R. rickettsii, independente de sexo, idade, hábito de visitar ambientes florestais ou de estarem em contato direto com equinos e capivaras. O diagnóstico sorológico permitiu evidenciar muitos cães infectados por R. rickettsii, e condições ambientais, como a presença de áreas ribeirinhas, foram importantes para a ocorrência de Febre Maculosa Brasileira na região noroeste do Estado do Rio de Janeiro.

ABSTRACT The present paper is the first to perform this evaluation in dogs from the cities of Natividade, Porciuncula and Varre-Sai. The aim of this study is to search for Spotted Fever Group Rickettsia in canine sera using indirect immunofluorescence assay and to identify the probable causative agent of sera reactions in animals. Of the 253 sampled canines, 67.59% (171/253) were seroreactive for Rickettsia rickettsii and 11.07% (28/253) for Rickettsia parkeri, both in dilution 1:64. Titration of tested sera against R. rickettsii antigens reached 1:131.072 and, for R. parkeri, 1:4.096. We conclude that dogs are important sentinels for R. rickettsii infection, and can be infected regardless of sex, age, the habit of visiting woodlands or being in direct contact with equines and capybaras. Serological diagnosis has highlighted many dogs infected by R. rickettsii, and ambient conditions, such as the presence of flowing water bodies, was important for the occurrence of Brazilian Spotted Fever in the northwestern of Rio de Janeiro State.

Foram testados, pela técnica de soroaglutinação microscópica aplicada à leptospirose, 329 cães provenientes do município de Monte Negro, RO, dos quais 156 eram da área urbana e 173 da área rural. Simultaneamente foi aplicado questionário para verificar a existência de possíveis fatores de risco pela regressão logística. Abordaram-se questões referentes a idade, sexo, dieta, tipo de criação, ambiente, contato com outras espécies e hábito de caça. Foram detectadas reações com títulos >100 em 27,3%, com 90 cães positivos ao agente, das quais 23,7% eram da área (37/156) urbana e 30,6% (53/173), da área rural (P>0,05). Os sorovares predominantes, reatores com títulos mais elevados, foram Autumnalis (22%), Pyrogenes (12%), Canicola (10%) e Shermani (7,5%). Cães com idade acima de 12 meses apresentaram maior ocorrência de anticorpos quando comparados aos cães mais jovens (P<0,05). Dentre os fatores de risco analisados, foram significativos a alimentação (dieta à base de ração comercial - odds ratio: 3,3; intervalo de confiança: 95%: 1,2 - 9,2; P=0,02) e o sexo (macho - odds ratio: 2,3; intervalo de confiança: 95%: 1,3 - 3,9; P=0,003). Ressalta-se a ocorrência de reações para sorovares mantidos na natureza por animais silvestres.

The microscopic agglutination test was applied to 329 samples taken from 156 dogs from urban area and 173 from rural areas of Monte Negro County, Rondônia State, Brazil, to determine anti-Leptospira spp. antibodies. A survey was concomitantly done to detect eventual risk factors thru the use of logistic regression. Studied variables were age, sex, diet, management, environment, contact with other species and hunting habit. Titers >100 were detected in 27.3% (90/329) of the dogs, being 23.7% (37/156) urban and 30.6% (53/173) rural dogs. The most frequent serovars were Autumnalis (22.0%), Pyrogenes (12.0%), Canicola (10.0%) and Shermani (7.5%). Dogs older than 12 months showed higher positive frequencies than younger animals (P<0.05). Risk factor were associated with commercial food as compared to homemade food (odds ratio: 3.3; 95% confidence interval : 1.3 - 3.9; P=0.02) and associated with sex, with higher occurrence in males than in females (odds ratio: 2.3; 95% confidence interval: 1.3 - 3.9; P=0.003). It was emphasized the serological occurrence of serovars kept and spread in nature by wild animals.

RESUMO De julho a agosto de 2001, foram colhidas amostras de fezes de 95 cães (13,8% da população canina) da área urbana do Município de Monte Negro, Rondônia. As amostras de fezes foram examinadas pelos métodos coproparasitológicos de Willis, centrífugo-flutuação em solução de sacarose e centrífugo-sedimentação em água-éter. Das 95 amostras de fezes, somente 15 (15,8%) foram negativas. Foram encontrados helmintos pertencentes a 5 gêneros: Ancylostoma, Toxocara, Trichuris, Spirocerca, Physalopterae 5 protozoários: Sarcocystis, Giardia, Cystoisospora, Cryptosporidium, Hammondia-Neospora. Ovos de Ancylostoma spp. foram os mais prevalentes (73,7% de amostras positivas), seguidos por ovos de Toxocara canis (18,9%) e esporocistos de Sarcocystis spp. (18,9%). Os demais parasitos tiveram prevalências abaixo de 10%. Os resultados encontrados foram comparados com outros trabalhos brasileiros, demonstrando que o gênero Ancylostoma é o mais freqüentemente diagnosticado em cães no Brasil.

ABSTRACT From July to August 2001, individual fecal samples were collected from 95 dogs (13.8% of the canine population) living in the urban area of Monte Negro, Rondônia. The fecal samples were processed by the following coproparasitological methods: Willis (simple flotation), centrifugal flotation employing sacarose solution, and centrifugal sedimentation employing water-ether. Only 15 (15.8%) out of 95 fecal samples were negative. Five helminth genera were found: Ancylostoma, Toxocara, Trichuris, Spirocerca, Physaloptera; as well as 5 protozoan genera: Sarcocystis, Giardia, Cystoisospora, Cryptosporidium, Hammondia-Neospora. Ancylostoma spp. eggs were the most prevalent (73.6% of positive samples), followed by Toxocara canis eggs (18.9%) and Sarcocystis spp. sporocysts (18.9%). Prevalence of the remaining parasites was less than 10%. The results were compared with other Brazilian studies, showing that the genus Ancylostoma is the most frequently found on dogs in Brazil.

Amostras de 10 e 14 pulgas Ctenocephalides felis felis foram coletadas de cães nos municípios de Pedreira e Mogi das Cruzes, respectivamente, no estado de São Paulo, para pesquisa de Rickettsia spp. As pulgas foram individualmente submetidas à reação em cadeia pela polimerase, tendo como alvo os genes 17-kDa e 190-kDa (OmpA) de Rickettsia, sendo esse último específico para o GFM. Nove pulgas de Pedreira (90%) e quatro pulgas de Mogi das Cruzes (28%) foram positivas para o gene 17-kDa, e oito pulgas de Pedreira (80%) e quatro de Mogi das Cruzes (28%) foram positivas para o gene 190-kDa. As seqüências de nucleotídeos do gene 190-kDa de uma pulga de Pedreira e de uma pulga de Mogi das Cruzes foram 100% idênticas; quando comparadas com dados existentes no GenBank, foram 100% idênticas com a seqüência parcial do gene 190-kDa de Rickettsia felis. Esse foi o primeiro relato de sua ocorrência no estado de São Paulo.

Samples of 10 and 14 Ctenocephalides felis felis fleas were collected on dogs from Pedreira and Mogi das Cruzes municipalities, respectively, in the State of São Paulo, Brazil, for detection of Rickettsia spp. Individual fleas were submitted to Polymerase Chain Reaction targeting the 17-kDa and the 190-kDa (OmpA) genes of Rickettsiae. This later gene is specific for spotted fever group. Nine fleas from Pedreira (90%) and four fleas from Mogi das Cruzes (28%) were positive for the 17-kDa gene, and eight fleas from Pedreira (80%) and four from Mogi das Cruzes (28%) were positive for 190-kDa gene. The nucleotide sequence of the 190-kDa products of one flea from Pedreira and one flea from Mogi das Cruzes were 100% identical to each other, and when compared to the GenBank Data, they were 100% identical to the 190-kDa sequence of R. felis. This was the first report of its occurrence in the State of São Paulo.

During January and February, 2000, 133 dogs from 21 farms located in eight diferent counties at the northern region of Paraná, Brazil, were examined for ticks. Ticks found on dogs were collected and identified. Information about dog rearing system was also obtained. Fifty-five ticks were collected on 19 dogs (14.3%) from 11 farms (52.4%). Four species were identified: Rhipicephalus sanguineus (20 ticks on nine dogs from seven farms), Boophilus microplus (15 ticks on five dogs from five farms), Amblyomma ovale (nine ticks on six dogs from four farms) and Amblyomma aureolatum (11 ticks on three dogs from one farm). The results are discussed considering the behavior of some dogs used to stroll into the woods and pasture areas whereas other dogs remained closer to the human facilities.

Em abril de 1999, cinco espécimens de carrapatos foram colhidos de dois eqüinos que haviam chegado há um dia de Portugal em uma propriedade rural no interior do Estado de São Paulo. Os carrapatos foram enviados vivos ao laboratório e foram identificados como Hyalomma marginatum e Rhipicephalus bursa. Esta última espécie foi criada em laboratório para obtenção de novos adultos para confirmação da identificação. Tanto H. marginatum como R. bursa são espécies consideradas restritas ao Velho Mundo, onde atuam como vetores de vários patógenos para os animais domésticos. Os procedimentos técnicos realizadas com o objetivo de prevenir um possível estabelecimento desses carrapatos na propriedade rural são descritos.